以色列BI(Sartorius)MSC无血清培养基货号:05-200-1A 基础培养基,05-200/201Kit(05-200-1A+05-201-1U)(基础培养基+营养添加物)
规格:500ml/瓶,100ml/瓶(基础培养基);3ml/瓶,0.6ml/瓶(基础添加物)
实验前准备:
5.1培养基的准备
5.1.1冻存的MSC NutriStem® XF Supplement在室温或2-8℃解冻,避免反复冻融。
5.1.2配制:MSC NutriStem® XF Basal Medium(培养基):MSC NutriStem® XF Supplement(添加物):青链双抗=500ml:3ml:5ml,4℃保存,2周内使用。
注1:双抗非必须,建议原代(P0)时使用。
注2:培养基含L-Glutamine,贮藏时避免长期照光。
5.2包被培养皿
或跳过此步骤,直接加2%血小板裂解物,促进MSC细胞贴壁与生长。
如果使用05-752-1H,参考如下步骤:
5.2.1使用DPBS溶液(BI, Cat# 02-023-1A),将MSC贴壁试剂稀释100倍(1:100)。
5.2.2参照表3,加入适量的1X MSC贴壁试剂涂层培养皿或板。
表3 涂层过程中贴壁试剂建议使用量(05-752-1)
培养器皿表面积cm2/孔或瓶1X MSC贴壁试剂使用体积
96孔板0.340.05~0.1 ml
24孔板1.90.2~0.4 ml
12孔板3.90.4~0.8 ml
6孔板/ 35 cm培养皿9.61~2 ml
T25瓶/ 60 cm培养皿252.5~5 ml
T75瓶757.5~15 ml
注1:涂层的培养皿需在无菌条件下2℃-8℃储存,需在一周内使用。(标示红色为原厂建议使用量,经过实验测试后可减半使用)
注2:包被期间, 注意包被液不可以干掉!
5.2.3轻轻摇动培养皿,确认贴壁试剂均匀分布在培养皿表面后,用封口膜包裹涂层的培养皿。
5.2.4在2-8℃孵育过夜;或者在CO2培养箱,37℃,至少孵育30分钟。
5.2.5接种前, 吸除贴壁试剂,再用DPBS轻轻冲洗培养皿,即可接种细胞。
如果使用05-760-1-15,参考如下步骤:
5.2.1使用生理盐水,将NutriCoat™ 促贴壁试剂稀释500倍(1:500)。
5.2.2参照表4,加入适量的1X NutriCoat™ 促贴壁试剂涂层培养皿或板。
以色列BI(Sartorius)MSC无血清培养基产品链接:
http://www.haozebiotec.com/ParentList-2404250.html
https://www.chem17.com/st396886/list_2404250.html